Erweiterung des genetischen Codes von Candida albicans zur Analyse von Protein-Protein Interaktionen in vivo
Berichte aus Forschung und Entwicklung IGB, Band 56
Silke Grumaz
Hrsg.: Fraunhofer IGB, Stuttgart
2014, 203 S., zahlr., teils farb. Abb. u. Tab., Softcover
Stuttgart, Univ., Diss., 2014
Fraunhofer Verlag
ISBN 978-3-8396-0685-8

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Inhalt
In der vorliegenden Arbeit wurde der genetische Code des humanpathogenen Pilzes Candida albicans durch gezielte Etablierung und Optimierung eines orthogonalen Pärchens bestehend aus tRNA und tRNA-Synthetase um die synthetische Aminosäure p-Azidophenylalanin erweitert. Nach Integration der synthetischen Aminosäure in vivo und UV-Bestrahlung war eine positionsspezifische Kreuzvernetzung binärer Protein-Protein-Interaktionen möglich, wie anhand von zwei Modellproteinen gezeigt werden konnte. Diese kreuzvernetzten Proteinkomplexe konnten zudem aufgereinigt und massenspektrometrisch analysiert warden. Somit konnte die generelle Eignung der Methode für die Identifizierung auch unbekannter Interaktionen gezeigt werden und ein wirkungsvolles Werkzeug für die Candida-Forschung etabliert werden.

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